一、琼脂细胞块制备法: (1)取底部沉淀样本20ml,3000转/分,离心5-10分钟。 (2)吸干上清液,离心沉渣用10%中性福尔马林固定1小时。 (3)吸干液体。 (4)滴加少许融化的琼脂,摇动试管使其充分混合,3000转/分,离心,5-10分钟。此时,琼脂已凝固。 (5)将琼脂块取出,切成大小合适的块状放入脱水盒,按常规制备蜡块。
二、蛋清细胞块制备法: (1)取底部沉淀样本20ml,3000转/分,离心5-10分钟。 (2)加鸡蛋清lml,用扁平的竹签轻轻刮取试管底部的细胞,尽量 使细胞成团悬浮于蛋清中,离心5min(2000转/min)。 (3)去除多余蛋清,沿管壁轻轻加入10 %中性福尔马林固定液2ml。蛋清遇到福尔马林立即凝固使细胞成团块状,轻轻摇动,让细胞团块悬浮于固定液中固定,过夜,轻轻取出细胞团块,用包埋纸包好,放入脱水盒,按常规制备蜡块。 三、直接细胞块制备法(当细胞量较多时可使用) (1)取底部沉淀样本20ml,3000转/分,离心5-10分钟。 (2)吸干上清液,轻轻沿管壁加入95%酒精,3000转/分,离心5分钟,静置1小时。 (3)用竹签轻轻将沉淀物取出,用包埋纸包好。 (4)放入脱水盒, 10%中性福尔马林固定1小时,按常规制备蜡块。
四、戊二醛细胞块制备法: (1)取底部沉淀样本20ml,3000转/分,离心5-10分钟。 (2)吸干上清液,加入3 %戊二醛10ml,充分混合, 3000转/分, 离心5-10分钟。 (3)用竹签轻轻将沉淀物取出。 (4)放入脱水盒, 10%中性福尔马林固定1小时,按常规制备蜡块。 |