尼氏体
一、缓冲亚甲蓝法（ Pischingert法）
试剂配制：
（1）0.2N醋酸盐缓冲液，pH4.6
甲液：冰醋酸1.2ml，蒸馏水加至100ml
乙液：醋酸钠含3H2O 2.72g，蒸馏水加至100ml
两液等份混合后调pH至4.6。
（2）缓冲亚甲蓝染液：0.2N醋酸盐缓冲液，pH4.62ml，亚甲蓝0.064g，蒸馏水98ml
（3）4%钼酸铵液：钼酸铵4g，蒸馏水加至100ml
操作方法：
1、切片脱蜡至水。
2、入缓冲亚甲蓝染液内染10分钟。
3、0.2N醋酸盐缓冲液（pH4.6）分化1-3分钟，在显微镜下观察。
4、4%钼酸铵液处理切片3-5分钟。
5、蒸馏水洗。
6、常规脱水透明，中性树胶封固。
结果：尼氏体染成鲜蓝色。

二、混合染色法
试剂配制：
（1）混合染色液：焦油紫10mg，硫堇10mg，亚甲蓝10ml，甲苯胺蓝10mg，蒸馏水100ml
（2）0.5%曙红酒精液：曙红Y0.5g，95%酒精加至100ml
操作方法：
1、切片脱蜡至水。
2、混合染色液染24小时。
3、蒸馏水稍洗。
4、用95%酒精分化，显微镜下控制。
5、入0.5%曙红酒精液复染数秒钟。
6、无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：尼氏体及核仁呈紫蓝色，其他组织红色。
注意事项：
1、用于尼氏体染色的组织要新鲜，固定迅速。否则，尼氏体可溶解而不易着染。
2、尼氏体的染色标本需避光保存，容易褪色。

 　　　　　　　　 神经轴突
一、银浸镀法（Marsland，Glees和Erikson，1954）
试剂配制：
（1）0.5%火棉胶液：火棉胶片0.5g，无水酒精乙醚液（1:1）加至100ml，待火棉胶慢慢溶解混合均匀即可。
（2）20%硝酸银溶液：硝酸银20g，蒸馏水加至100ml
（3）Marsland氏银氨溶液：将20%硝酸银水溶液30ml以及无水酒精20ml混合，然后逐滴加入氢氧化铵，边滴边摇动，直至最初形成的沉淀刚好溶解，再加入氢氧化铵5滴，即可。
（3）5%硫代硫酸钠水溶液：硫代硫酸钠5g，蒸馏水加至100ml
操作方法：
1、切片脱蜡至无水酒精。再入无水酒精乙醚（1：1）混合液稍洗。
2、入0.5%火棉胶液浸半分钟。
3、取出切片，抹去切片底面多余火棉胶液，稍干后将切片放入80%酒精10分钟。
4、蒸馏水浸洗。
5、放入预先加热至37℃的20%硝酸银液内30分钟。
6、蒸馏水速洗。
7、入10%中性甲醛液还原，共2次，每次10秒钟。
8、不用水洗，直接入Marsland氏银氨液作用30秒钟。
9、取出切片，抹去多余的银氨液，直接入10%中性甲醛液还原约1分钟。
10、蒸馏水冲洗，镜下观察。
11、5%硫代硫酸钠液处理1分钟。
12、流水冲洗。
13、经各级酒精脱水，再用无水酒精乙醚（1:1）除去火棉胶膜。
14、二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：神经轴突，树突呈棕黑色，背景淡棕色。

二、甘氨酸银浸镀法（ Palmgren，1948）
试剂配制：
（1）酸性甲醛液：甲醛液25ml， 蒸馏水75ml，1%硝酸水溶液0.2ml
（2）5%甘氨酸水溶液：甘氨酸5g，蒸馏水加至100ml
（3）甘氨酸银溶液：硝酸银15g，硝酸钾10g，蒸馏水100ml，5%甘氨酸水溶液1ml
（4）还原液：焦性没食子酸（pyrogallol）1g，蒸馏水45ml，无水酒精55ml，1%硝酸水溶液0.2ml
配制完24小时后使用。
（5）氯化金水溶液：氯化金1g，蒸馏水200ml，冰醋酸0.2ml
（6）苯胺油酒精液：50%酒精100ml，苯胺油2滴
（7）5%硫代硫酸钠液：硫代硫酸钠5g，蒸馏水加至100ml
操作方法：
1、切片脱蜡至水。
2、入酸性甲醛液于室温处理5-10分钟。
3、蒸馏水洗3次，每次约2分钟。
4、把切片置入甘氨酸银液于室温（20-25℃）作用15-30分钟，如果在37℃温箱内作用约需4-5分钟。
5、取出切片用滤纸吸干多余银液。
6、入预热45℃的还原液作用1分钟。将还原液在水浴中加热至45℃，立即插入切片，并轻轻摇动，当还原液有云雾状混浊时，更换新的还源液，约1分钟至无雾状出现，再持续半分钟。
7、用50%酒精洗切片5-10秒钟后，再用蒸馏水洗，镜下观察。如颜色仍淡可由第3步开始再重复一次，并减少在甘氨酸银液的浸镀时间，也可在还原液作用时的温度降底至37℃。
8、入氯化金水溶液数分钟，直到黄棕色脱去。
9、滴入苯胺油酒精液加强染色，约15秒钟。
10、流水冲洗切片。
11、5%硫代硫酸钠液处理1分钟。
12、流水冲洗。
13、常规脱水透明，中性树胶封固。
结果：神经纤维呈棕至黑色。

 　　　　　　　　　  神经髓鞘
 一、碳酸锂苏木素法（Loyez，1910）
试剂配制：
（1）La Manna氏铬化液：重铬酸钾9.5g，氯化锌4.5g，蒸馏水100ml
（2）4%硫酸铁铵水溶液：硫酸铁铵4g，蒸馏水加至100ml
（3）10%苏木素无水酒精液：苏木素10g，无水酒精加至100ml
用小口砂塞瓶盛装，混合溶解后放置2-3周成熟。
（4）碳酸锂苏木素染液：10%苏木素无水酒精液（成熟）10ml，碳酸锂饱和水溶液2ml，蒸馏水88ml
（5）Loyez氏分化液：四硼酸钠1g，铁氰化钾1.25g，蒸馏水100ml
操作方法：
1、组织固定于20%甲醛液或甲醛钙液，以不少于三天为宜。
2、入La Manna氏铬化液于37℃处理1-2天。
3、流水冲洗一晚。
4、常规脱水包埋，石蜡切片，厚约4-6μm。
5、切片脱蜡至水。
6、4％硫酸铁铵水溶液媒染12-24小时。
7、蒸馏水洗二次。
8、碳酸锂苏木素染液染12-24小时。
9、自来水洗去多余染液。
10、4%硫酸铁铵水溶液初步分化，并经常取出，蒸馏水洗，显微镜下观察，至其他组织呈淡灰黄色而髓鞘显示清晰为止。
11、自来水洗2分钟。
12、入Loyez氏分化液完成分化，约2分钟。
13、自来水充分洗。
14、常规脱水透明，中性树胶封固。
结果：髓鞘及红细胞呈深蓝色，其他组织淡黄色至灰黄色。
注意事项：
1、10%苏木素无水酒精溶液要提前配制，因配制后须经二、三个星期以上才成熟可用，因此需作为贮备液存放。
2、在用4%硫酸铁铵液分化时，要经常在镜下观察，不可分化过度，可改用2%硫酸铁铵水溶液分化。

二、砂罗铬花青法（改良的Page法，1965，1970）
试剂配制：
（1）10%硫酸铁铵水溶液：硫酸铁铵10g，蒸馏水加至100ml
（2）砂罗铬花青染液：砂罗铬花青R0.2g，蒸馏水96ml，10%硫酸铁铵水溶液4ml，浓硫酸0.5ml，依次溶解，充分混合，用小口砂塞瓶盛装室温保存。
（3）荧光桃红染液：荧光桃红B（phloxine Ｂ）0.5g，0.5%氯化钙水溶液100ml
操作方法：
1、组织固定于20%甲醛液，以不少于3天为宜，按常规脱水包埋，切片厚4-6μm。
2、切片脱蜡至水。
3、滴加砂罗铬花青染液于切片上，室温染15-20分钟。
4、倾去染液，流水冲洗1-2分钟。
5、10%硫酸铁铵水溶液分化1-5分钟，至胶原纤维和肌纤维接近无色或淡灰色，髓鞘呈清晰的蓝色为止，每次取出水洗后应在显微镜下观察控制。也可用4%硫酸铁铵液分化，但作用很慢，需要时间较长。
6、流水冲洗5-10分钟。
7、荧光桃红染液复染数秒钟。
8、水洗后各级酒精脱水。
9、二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：髓鞘呈鲜蓝色，红细胞深蓝色，神经细胞胞质，肌纤维及胶原纤维鲜红色。胞核和核仁蓝色。

　
   　　　　　　　　神经胶质细胞
氯化金升汞法（ Gajal，1913）
试剂配制：
（1）溴甲醛液：溴化铵2g，甲醛液15ml，蒸馏水85ml
（2）氯化金升汞液：1%氯化金液10ml，二氯化汞0.5g，蒸馏水60ml
将二氯化汞溶于蒸馏水（可适当加温促使溶解），待稍冷加入氯化金液充分混合后过滤，本液在临用前配制。
（3）5%硫代硫酸钠液：硫代硫酸钠5g，蒸馏水加至100ml
操作方法：
1、新鲜组织，厚3-5mm，固定于溴甲醛液2-5天。
2、流水冲洗20分钟，再用蒸馏水洗。
3、冰冻切片厚20-30μm。
4、蒸馏水洗3次，每次约数秒钟。
5、用玻璃钩小心将切片捞入氯化金升汞液于室温暗处镀染4-8小时，当切片呈紫红色时，即取一片置于载玻片放在显微镜下观察，在低倍镜下见星形细胞出现即可。
6、蒸馏水稍洗。
7、5%硫代硫酸钠液处理5分钟。
8、用自来自水充分洗涤数次，再用蒸馏水洗，并将切片贴在载玻片上，凉干，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：星形胶质细胞及其突起呈紫红色至紫黑色，神经细胞浅紫红色，神经纤维一般不着色。