苏旦Ⅲ 法 试剂配制: 苏旦Ⅲ 0.1-0.2,70% 酒精100 ml 将苏旦Ⅲ置于70%酒精中,加热饱和,在未冷前过滤,静置一夜。 染色步骤: 1. 冰冻切片(8-10微米)。 2. 70%酒精固定1分钟。 3. 放入苏旦Ⅲ酒精溶液中20-30分钟。 4. 70%酒精洗去多余的染料。 5. 水洗。 6. 苏木素复染2-5分钟。 7. 1%盐酸酒精分化。 8. 水洗,蓝化,甘油封固。 结果:脂肪桔黄或红色。一般用于确定胞浆内空泡究竟是糖原,水变性还是脂滴。
苏丹Ⅳ(猩红)(Sudan Ⅳ)染色法: 试剂配制: 将1-2克猩红染剂加纯酒精70ml,10%氢氧化钠20ml,蒸馏水10ml,制成混合液,略加热,置37℃温箱中1小时,取出冷却后过滤,12小时后即可使用。此液5天内失效,建议配制70%酒精饱和液。 染色步骤: 1. 冰冻切片(8-10微米)。 2. 70%酒精固定1分钟。 3. 放入苏旦Ⅳ酒精溶液中20-30分钟。 4. 70%酒精洗去多余的染料。 5. 水洗。 6. 苏木素复染2-5分钟。 7. 1%盐酸酒精分化。 8. 水洗,蓝化,甘油封固。 结果:脂肪呈猩红色。
油红染色法: 试剂配制: 油红O 0.5g,异丙醇100ml,配成饱和液,长期保存备用。 油红稀释液的配制:取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。 染色步骤: 1. 冰冻切片(8-10微米)。 2. 70%酒精固定1分钟。 3、蒸馏水洗。 4、油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。 5、60%乙醇镜下分化至间质清晰。 6、水洗。 7、Marry氏苏木素复染核。 8、水洗。 9、甘油或甘油明胶封片。 结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。
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