一、间苯二酚品红法 (根据Weigert,1898) 试剂配制: (一)30%三氯化铁液 三氯化铁 30g 蒸馏水加至 100 ml (二)间苯二酚品红液 碱性品红(basic fuchsin) 1g 间苯二酚(resortin) 2g 蒸馏水 100 m1 30%三氯化铁液 12.5ml 浓盐酸 2ml 配制法:取一个500毫升烧杯,放入碱性品红,间苯二酚和蒸馏水,用玻璃棒搅拌,加热煮沸,再慢慢加30%三氯化铁液,在搅拌下继续煮沸3~5分钟,冷却后过滤,把滤液倾去不用,将滤纸和沉淀物一同放回烧杯内,置入干燥箱内烘干,取出后加入95%酒精100毫升,在水锅内加热并不断搅拌至沉淀物完全溶解后取出滤纸,冷却后过滤,并补足因蒸发失去的酒精至100毫升,最后加浓盐酸2毫升,混合后即可使用。 (三)Van Gieson氏染液 A液: 1%酸性品红水溶液 B液:苦味酸饱和水溶液(约1.2%) A、B两液分瓶盛放。临用前取A液1份,B液9份混合后使用。 操作方法: 1.组织固定于10%甲醛液,按常规脱水包埋。 2.切片脱蜡至95%酒精。 3.入间苯二酚品红液1~2小时。 4. 直接用95%酒精洗去多余染液并分化至无余色脱下,此时可在显微镜下观察,如染色弥漫不清晰,可再用1%盐酸酒精稍分化。 5. 自来水冲洗。 6.用Van Gieson氏液复染约半分钟。 7.95%酒精分化,无水酒精脱水。 8.二甲苯透明,中性树胶封固。 结果: 弹力纤维呈深蓝黑色,胶原纤维红色,肌纤维和红细胞黄色。 二,地衣红法 (根据Taener?Unna法) 试剂配制: 地衣红酒精液 地衣红(orcein) 1g 70%酒精 lOOml 浓盐酸进制 lml 将地衣红溶于70%酒精,然后加入浓盐酸,放置1~2天后即可使用。 操作方法: 1.组织固定于10%甲醛液,按常规脱水包埋。 2.切片脱蜡至70%酒精。 3.入地衣红酒精液染3小时。 4.70%酒精浸洗二次,每次约半分钟,至染液不脱色为止。 5.95%酒精,无水酒精脱水。 6.二甲苯透明,中性树胶封固: 结果: 弹力纤维呈深棕红色。 |