一、电炉隔水加热法 (1) 将薄小(10X10X2mm)的组织放入40%甲醛的小烧杯中,烧开10秒,然后移去酒精灯,再固定1分钟 (2) 用手术刀将组织修成1毫米左右厚的薄片,再放回40%的甲醛(热)溶液内1分钟 (3) 将组织取出,水洗 (4) 用滤纸压干组织中的水份 (5) 再放入水浴的纯丙酮中4~6分钟(中间更换一次丙酮)水温控制在70℃左右 (6) 轻压组织有弹性感后,放入60~70℃的石蜡中浸蜡5分钟 (7) 用加热的电烙铁将组织嵌入事先准备好的空蜡块中,用载玻片压平组织,放在冰上冷却 (8) 常规石蜡切片,轻轻的将蜡块修至组织面完全暴露后,切片,切片厚度4~5微米,修片时不能修的太厚,否则组织容易蹦出。 (9) 将切片捞于载玻片后加热烤片10~15秒,烤片温度不宜超过80℃,更不能将组织烤焦,可边烤边用湿布磨擦载玻片反面降温 (10) 快速放入二甲苯快速脱蜡(2道),梯度酒精洗,入水 (11) 苏木素滴加在载玻片上,加热1~2分钟(60℃左右,不能将苏木素烧开,以防切片脱落) (12) 水洗 (13) 盐酸酒精分化1秒钟 (14) 水洗,温水蓝化 (15) 伊红2~5秒钟 (16) 梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 注意事项:由于丙酮极易挥发燃烧,使用电炉隔水加热法必须时刻注意安全
二、超声波快速处理仪法 (1) 先将超声波快速处理仪开机预热至70℃ (2) 将薄小(10X10X2mm)的组织放入40%的甲醛或AAF液的小烧杯中超声处理4分钟 (3) 用手术刀将组织修成1毫米左右厚的薄片,再放回固定液内2分钟 (4) 取出组织,水洗10秒钟,放在滤纸上吸干 (5) 放入纯丙酮中超声处理2~3分钟,取出组织,放在滤纸上吸干,再放入纯丙酮4~6分钟,直至组织上浮 (6) 放入二甲苯中超声处理3分钟 (7) 放入熔融的石蜡中(70℃)超声处理5分钟,可用镊子轻压组织,直至无气泡产生 (8) 用加热的电烙铁或镊子将组织嵌入事先准备好的空蜡块中,用载玻片压平组织,放在冰上冷却 (9) 常规石蜡切片,轻轻的将蜡块修至组织面完全暴露后,切片,切片厚度4~5微米 (10) 将切片捞于载玻片后加热烤片10~15秒,烤片温度不宜超过80℃,更不能将组织烤焦,可边烤边用湿布磨擦载玻片反面降温 (11) 快速放入二甲苯快速脱蜡(2道),梯度酒精洗,入水 (12) 苏木素滴加在载玻片上,加热1~2分钟(60℃左右,不能将苏木素烧开,以防切片脱落) (13) 水洗 (14) 盐酸酒精分化1秒钟 (15) 水洗,温水蓝化 (17) 伊红2~5秒钟 (18) 梯度酒精快速脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 |