胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内。在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
    一、苦味酸?酸性品红法 (Van Gieson，1889)   
    试剂配制：
    (一)Weigert氏铁苏木素液
    A液：苏木素                           1g
    无水酒精                               100m1
    B液：30％三氯化铁液                   4ml
    蒸馏水                                 100ml
    纯盐酸                                 lml
    A、B两液需分瓶盛放，A液配制后数天即可用，不宜配制过多，如保存时间过长则染色不良。平时应密封保存，B液配制后立即可用。临用前将A、B两液等量混合。
    (二)Van Gieson氏染液
    A液：  1％酸性品红水溶液
    B液：苦味酸饱和水溶液(约1.2％)
A、B两液分瓶盛放。临用前取A液1份，B液9份混合后使用。
      
 操作方法：
  1. 组织固定于10％甲醛液，常规脱水包埋。
  2．切片脱蜡至水。
  3．用Weigert氏铁苏木素液染5～10分钟。
  4. 流水稍洗。 
  5．1％盐酸酒精迅速分化。 
  6. 流水冲洗数分钟。   
  7．用Van Gieson氏液染1～2分钟。
  8．倾去染液，直接用95％酒精分化和脱水（可放入温箱烤干后，直接透明封片）。
  9. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
        结果:    
    胶原纤维呈鲜红色，肌纤维，胞质及红细胞黄色，胞核蓝褐色。
     

（二）、Masson 三色染色法
   丽春红酸性品红液： 丽春红 0.7 g ，酸性品红0.3 g，
   蒸馏水99ml，冰醋酸1 ml
   苯胺蓝液: 苯胺蓝2 g ，蒸馏水98 ml，醋酸2 ml 
   亮绿液： 亮绿0.2g ，蒸馏水100 ml，冰醋酸0.2 ml
染色步骤：
1. 切片脱蜡至蒸馏水
2. 苏木素染5～10分钟
3. 盐酸酒精分化
4. 流水蓝化，蒸馏水洗(苏木素可不染)
5. 丽春红酸性品红液中染5～8分钟
6. 蒸馏水洗
7. 1% 磷钼酸中染1～3分钟
8. 不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟 (如染色效果不佳,可在冰醋酸内脱色后重染)
9. 水速洗，置60℃温箱中烘干，二甲苯透明,封固
    结果:胶原纤维蓝色（苯胺蓝复染）或绿色（亮绿复染）,肌纤维、纤维素红色。

    注意事项：
1．组织用Bouin氏液固定为佳。。
2．用l％磷钼酸处理时可在镜下控制，见肌纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可。