1、苏木素 (1) Harris苏木素(退行性染色): 配方: 苏木素 1 g 无水乙醇 10 ml 蒸馏水 200 ml 钾明矾 20 g HgO 0.5 g
先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把硫酸铝钾(起媒染作用。媒染剂:凡能与染料与组织结合,生成色淀,并促进染色的金属离子盐类或金属原子的含氧酸)放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸 2 分钟,先加入少量的氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定:以每天100张片的量,可使用半个月左右。 (2)Gill改良苏木素液(进行性染色) : 苏木精 2 g 无水酒精 250 ml 硫酸铝 17.6 g 蒸馏水 750 ml 碘酸钠 0.2-0.3 g 冰醋酸 20 ml 先将苏木精溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。此液为半氧化进行性苏木素液,染色一般不需要分化,不会产生沉淀,氧化膜少。常有人配制此液染不上色或染色较慢,可能与碘酸钠的失效有关,可适当多加一点。
2、桔黄G6: 桔黄G 0.5克溶于5 ml 蒸馏水中,加入纯酒精100 ml,然后加磷钨酸0.015克,用时过滤。
3、EA36 :是三种染料配合而成。(不可多配,不能久置) 淡绿SF :2.5克加入5 ml 蒸馏水中,加纯酒精500 ml 俾士麦棕: 0.5克加入5 ml 蒸馏水中,加纯酒精100 ml 醇溶性依红:2.5克加入95%酒精500 ml 配方: 0.5%淡绿液: 45 ml 0.5%俾士麦棕液: 10 ml 0.5%醇溶性依红液: 45 ml 混合后加磷钨酸0.2克,再加碳酸锂饱和溶液数滴,个人认为pH调至6.5左右比较好。
此法的关键在于亮绿( 淡黄),必须购买Light Green SF Yellowish (如SIGMA L5382),否则使用相类似的产品往往不容易着色或根本不着色。
4、EA50(配方一): 3%亮绿水溶液5毫升,纯甲醇125毫升, 20%伊红Y 水溶液10毫升,冰醋酸10毫升,磷钨酸1克,95%酒精350毫升。混合后加碳酸锂饱和溶液,(用pH计测)调pH至6.5左右。
5、EA50(配方二,推荐): 0.5%淡绿醇溶液: 225 ml 0.5%俾士麦棕液: 100 ml 0.5%醇溶性依红液: 450 ml 95%酒精 225 ml 磷钨酸 6克 混合后加碳酸锂饱和溶液,(用pH计测)调pH至6.5左右。
|